接下來喆圖小編就來給大家講講關于凍存的細胞如何做前處理及培養。
首先當我們收到包裝箱后,立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快,以避免升溫。不要將細胞儲存在-60℃的低溫冰箱中,這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。
接下來是培養細胞的關鍵:
(1) 將一管細胞從液氮罐中取出,注意保護手和眼睛。
(2) 將凍存管快速的放入37℃的電熱恒溫水浴鍋中,輕輕握住并旋轉,直到管內物體*融化。
(3) 將凍存管立即從電熱恒溫水浴鍋中拿出,擦干,轉入無菌環境。
(4) 用70%的酒精沖洗凍存管,然后擦去多余酒精。
(5) 打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋(注意,由于凍存管有負壓,開蓋時可能會有少量溢出,這是正?,F象)。
(6) 用多聚賴氨酸包被培養瓶。多數細胞推薦的接種密度為每平方厘米6000個細胞。
(7) 蓋好培養瓶的蓋子,輕輕搖晃培養瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子。
(8) 將培養瓶放入CO2培養箱中37℃恒溫培養。
(9) 放入CO2培養箱后第6-16小時更換一次培養基,以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。
以上內容僅供參考,一些細胞類型像神經細胞,神經膠質細胞和一些生長緩慢的上皮細胞,不推薦擴增培養和再次凍存。其它的細胞類型像成纖維細胞、星形細胞、腎系膜細胞、星形膠質細胞等等,可以擴增培養和再次凍存,如需了解詳情請聯系喆圖客服!
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